Avatar billede themask888 Juniormester
02. december 2005 - 12:20 Der er 3 kommentarer og
1 løsning

Biologiske spørgsmål

er faldet over 2 spørgsmål i biologi (eller rettere genteknologi) som er meget tricky, og håber der er nogle af jer der kan hjælpe med dem.

1) I et eksperiment kløves et plasmid med 5 forskellige restriktionsenzymer (AatII, AflIII, HindIII, EcoRI og PvuII), og ligeret til et PCR fragment kløvet med AatII og AflIII. Årsagen til at plasmidet kløves med 5 restriktionsenzymer, er jo for at det ikke ligerer til sig selv igen.
Spørgsmålet er så om en anden metode til at opnå det samme?

2) Hvornår er "traditionel" PCR mere egnet i laboratoriet end Realtime-PCR?

På forhånd tak for hjælpen

Themask888
Avatar billede darth-domino Nybegynder
02. december 2005 - 13:19 #1
Puha godt jeg ikke havde biologi på Teknisk Skole!
Avatar billede tobias28 Praktikant
02. december 2005 - 19:37 #2
vist et 200 points spm.. ;-)
Avatar billede ace_v Nybegynder
04. december 2005 - 20:24 #3
Skriver lige lidt teori om skidtet først. Hvis du er inde i stoffet så bare overse det og smut ned til det sidste :)

Når du kløver et plasmid eller et andet DNA-molekyle for den sags skyld kløver du enten ved
1: Denaturering af de enkelte molekyler hvorved du får en ubestemmelig mængde diffust DNA, eller RNA afhængig af din behandling af stoffet.
eller
2: kløvning af DNA-molekyle ved restriktionsenzymer som du har gjort hvorved du både er sikker på at få en nu forkortet DNA-streng samt en specifik datainformation angående hvor i koden der er blevet skåret.

Nu tilkobles en primer (dvs en startkode for DNA-polymerasen) til dit klippede DNA-stykke...jeg går ud fra at det er det du mener når du skriver at det tilklippede stykke DNA kobles til et PCR-fragment...og DNA-polymeraseproteinet kopierer nu en RNA-streng til det når et stop-codon. Herved multiplikation af DNA.

Men hvorfor skal du have klippet dit plasmid med 3 andre restriktionsenzymer når du kun skal bruge de to første til at tilkoble din primer?
Avatar billede themask888 Juniormester
05. december 2005 - 10:50 #4
ace_v: jeg tror du har misforstået spørgsmålet. Men generelt er det sådan så hvis vi kun kløver plasmiddet med de samme restriktionsenzymer som vi kløver PCR-fragmentet med, kan vi risikerer at plasmiddet bare ligerer til sit eget fragment igen. De 3 andre restriktionsenzymer sørger for at det fragment der bliver kløvet ud fra plasmiddet, bliver klippet i mindre stykker...

Men tak fordi I forsøgte. Og siden jeg ikke har fået et svar på mine spørgsmål, lukker jeg det hermed...
Avatar billede Ny bruger Nybegynder

Din løsning...

Tilladte BB-code-tags: [b]fed[/b] [i]kursiv[/i] [u]understreget[/u] Web- og emailadresser omdannes automatisk til links. Der sættes "nofollow" på alle links.

Loading billede Opret Preview
Kategori
Computerworld tilbyder specialiserede kurser i database-management

Log ind eller opret profil

Hov!

For at kunne deltage på Computerworld Eksperten skal du være logget ind.

Det er heldigvis nemt at oprette en bruger: Det tager to minutter og du kan vælge at bruge enten e-mail, Facebook eller Google som login.

Du kan også logge ind via nedenstående tjenester